You are here

Продукция

Диагностический набор ИФА

Тест-система для диагностики алеутской болезни норок методом иммуноферметного анализа

Кат. №Наименование и краткое описаниеКоличество определенийИнструкция 
D-01Набор реагентов для иммуноферментного выявления в крови специфических антител к вирусу алеутской болезни норок (вирусному плазмоцитозу)2000PDFзаказать
D-02Набор реагентов для иммуноферментного выявления в крови специфических антител к вирусу алеутской болезни норок (вирусному плазмоцитозу)20000PDFзаказать

 


Описание:
Диагностическая тест-система D-01 предназначена для массового обследования поголовья норок с целью выявления в крови специфических антител к вирусу алеутской болезни норок (вирусному плазмоцитозу) иммуноферментным методом (ИФА). Тест-система D-01 представляет собой набор компонентов, основой которого является рекомбинантный белок оболочки вируса алеутской болезни норок штамма "ADVG". Набор рассчитан на исследование 2000 неизвестных образцов, 20 контрольных положительных, 20 контрольных слабоположительных и 20 контрольных отрицательных образцов. Компоновка набора позволяет дробно использовать реагенты для проведения нескольких серий анализов.

В состав набора входят:

  • Мембраны для нанесения образцов –  10 мембран с разметкой на 200 квадратов
  • Натрий углекислый кислый
  • Детергент
  • Гидроперит
  • Блокирующий раствор
  • Реакционный раствор
  • Проявляющий раствор
  • Антиген
  • Антитела
  • Конъюгат
  • Левамизол
  • Сыворотки крови для контроля (положительная, слабоположительная, отрицательная)
  • Ванночка для инкубации
  • Наставление по применению

Время проведения анализа:
6 часов

Принцип метода:
Метод основан на выявлении поликлональными антителами мечеными ферментативной меткой (конъюгатом) комплекса антиген-антитело, состоящего из рекомбинантного белка вируса алеутской болезни норок и иммобилизованных специфичных антител из сыворотки/крови исследуемого животного.

Хранение:
Наборы хранят в сухом темном месте при температуре +2°-+8°C. Замораживание реагентов набора не допускается.

Срок годности:
6 месяцев

Необходимое оборудование, материалы и реактивы для проведения анализа:

  • вода дистиллированная
  • емкость вместимостью 2000 мл
  • пинцет
  • стеклянные капилляры
  • вата нестерильная
  • фольга алюминиевая бытовая
  • фильтровальная бумага
  • термометр со шкалой 0-100оС
  • водяная баня
  • термостатируемый шейкер с орбитой не менее10 мм или орбитальный шейкер с орбитой не менее 10 мм в сочетании с термостатом соответствующей вместимости
  • светильник электрический с лампой мощностью не менее 75Вт

 

 

Диагностический набор РИОЭФ

Тест-система для диагностики алеутской болезни норок в реакции иммуноосмоэлектрофореза (РИОЭФ)

Кат. №

Наименование и краткое описание

Количество определений

Инструкция

 

D-03

Набор реагентов для выявления специфических антител к вирусу алеутской болезни норок (вирусному плазмоцитозу) в пробах сыворотки крови в РИОЭФ

2400

PDF

заказать

 

 

Описание:

Диагностическая тест-система D-03 предназначена для выявления животных, инфицированных вирусом алеутской болезни норок (вирусному плазмоцитозу) в реакции иммуноосмоэлектрофореза (РИОЭФ). Основным свойством тест-системы является способность выявлять специфические антитела к вирусу алеутской болезни в пробах сыворотки крови. Тест-система D-03 представляет собой набор компонентов, основой которого является рекомбинантный белок оболочки вируса алеутской болезни норок штамма "ADVG". Набор рассчитан на исследование 2400 неизвестных образцов, 50 контрольных положительных и 50 контрольных отрицательных образцов. Компоновка набора позволяет дробно использовать реагенты для проведения нескольких серий анализов.

В состав набора входят:

  • Антиген
  • Сыворотки крови для контроля (положительная и отрицательная)
  • Буферная смесь
  • Агароза
  • Наставление по применению

Время проведения анализа:

3-8 часов

Принцип метода:

Метод основан на электрофорезе белков в агарозном геле. При наличии в сыворотке исследуемой пробы специфичных антител к рекомбинантному белку вируса алеутской болезни норок происходит образование видимого преципитата участке взаимодействия.

Хранение

Наборы хранят в сухом темном месте при температуре +2°-+8°C. Антиген не допускается нагревать выше +40°С или подвергать воздействию прямых ультрафиолетовых лучей (в том числе солнечных), не рекомендуется замораживать.

Срок годности:

12 месяцев

Необходимое оборудование, материалы и реактивы для проведения анализа:

  • вода дистиллированная
  • натрий хлористый
  • источник постоянного тока типа Б5-50 или аналогичный;
  • камера для горизонтального электрофореза производства фирмы "Pharmacia" (Швеция) или аналогичная;
  • бумага фильтровальная
  • стекла предметные 24 x 75 мм2
  • светильник электрический с лампой мощностью не менее 75Вт

 

 

Набор для кальций-фосфатной трансфекции ДНК

Кальций-фосфатная трансфекция клеток млекопитающих была предложена сравнительно давно, однако остается одним из наиболее популярных методов для доставки больших доз ДНК в прикрепленные клетки. Этот метод позволяет добиться высоких уровней трансфекции (рутинно до 100%), обеспечивает отличный выход рекомбинантных белков и высокие титры лентивирусных частиц.

Кат. №Наименование и краткое описание

Количество реакций

Инструкция 
CPT-01Набор реагентов для доставки ДНК в клетки млекопитающих методом кальций-фосфатной трансфекции70PDFзаказать
CPT-02Набор реагентов для доставки ДНК в клетки млекопитающих методом кальций-фосфатной трансфекции140PDFзаказать

 


Для чего этот метод особенно хорош?
Для трансфекции средних и больших объёмов прикреплённых клеток. В силу особенностей протокола этот метод не рекомендуется к использованию для постановки скрининговых трансфекций (в 48-, 96- и 384-луночных планшетах), однако он дешевле и эффективнее других способов трансфекции для больших форматов, начиная с 12 луночных планшетов и заканчивая клеточными фабриками.

Какие типы клеток могут быть трансфицированы?
Практически любые прикреплённые (адгезионные) клетки, например, HEK293T, CHO, HeLa. Есть сообщения об успешном применении этого метода для трансфекции первичных клеток, в том числе фибробластов и даже нейронов. Для суспензионных клеток этот метод не рекомендуется.

В чем плюсы?
Высокий уровень наработки белков и вирусных частиц, при меньшей стоимости, чем многие другие агенты. Низкая токсичность для клеток.

Сколько времени занимает постановка трансфекции?
Этот метод не требует коинкубации компонентов, сразу после образования смеси её вносят к клеткам. Можно ставить много трансфекций за один раз, а также трансфицировать большие объемы клеток с минимальными трудозатратами.

Нужно ли менять среду?
Через 5-8 часов после постановки трансфекции среду желательно сменить, однако это не является обязательным условием.

Можно ли доставлять РНК при помощи этого подхода?
Не рекомендуется.

Каковы типичные результаты трансфекции при помощи этого набора?
Плазмиды рамером 3-6 т.п.н. рутинно трансфицируют 100% клеток HEK 293T, с плазмидами размером 6-10 т.п.н. эффективность достигает ~ 90% на клетках HEK293T. Ниже приведено фото клеток HEK293Т, через 24 часа после трансфекции плазмидой длиной 9 т.п.н., кодирующей GFP на второй позиции в бицистронной кассете.

Также при помощи набора достигаются высокие титры наработки лентивирусных частиц.  На графике ниже отображена эффективность трансдукции клеток HEK293T при помощи вирусных частиц, полученных после трансфекции ДНК нашим набором. Агент F — один из наиболее эффективных и популярных липофильных агентов, CaP — набор для кальций-фосфатной трансфекции. При помощи указанных способов были поставлены трансфекции в 6-см чашках, затем через 48 часов 2 или 20 мкл супернатанта были использованы для трансдукции клеток 293T. Эффективность трансдукции оценивали по доле GFP+ клеток, так как лентивирусные частицы кодировали EGFP.